Railroad Tycoon 3 zawiera 25 scenariuszy, które rzucają wyzwanie graczom, aby odtworzyć wspaniałe osiągnięcia historii kolejnictwa z całego świata. Gracze mogą układać tory (w tym tunele i wiadukty), wybierać spośród ponad 40 lokomotyw – od wczesnych parowozów po nowoczesne pociski – przewozić ponad 35 rodzajów ładunków w dynamicznej gospodarce oraz uczestniczyć w zaawansowanym rynku akcji. Nowy silnik 3D przenosi serię na wyższy poziom, umożliwiając płynne przejście od widoku 'oka z nieba' na cały kontynent do niezwykle szczegółowego zbliżenia pięknie wymodelowanego pociągu, budynku lub samego krajobrazu. Railroad Tycoon 3 oferuje również większe wsparcie dla trybu wieloosobowego niż jego poprzednik, integrując czat online i usługę dopasowywania graczy. Na domiar wszystkiego ścieżka dźwiękowa gry zawiera kolejną porcję najlepszego autentycznego bluesa, bluegrassu i muzyki amerykańskiej. Tryb wieloosobowy dostępny tylko w trybie LAN.